Liceo Scientifico Olivelli, Pavia – 6-7/2/20

Attività di promozione del laboratorio di scienze – Piano Nazionale Lauree Scientifiche 

Data: 6 e 7 febbraio 2020 presso il Laboratorio di Biologia Sperimentale ore 8:30 – 13:00

Docente: Prof. Palumbo Silvia

Studenti: 46 (classe 3a (20); classe 5a (26))

Attività di laboratorio previste (6 febbraio):

  • Digestione di DNA con enzimi di restrizione
  • Elettroforesi di DNA in gel di agarosio

Durante le attività pratiche verranno spiegate le procedure  per la digestione di DNA con enzimi di restrizione  e le caratteristiche della elettroforesi mirata alla separazione di molecole di acidi nucleici.

Attività di laboratorio previste (7 febbraio):

  • Ligasi di un prodotto PCR a vettore plasmidico
  • Trasformazione di cellule competenti di E. coli

E’ stata preparata una reazione di ligasi utilizzando un vettore plasmidico  e un inserto rappresentato da un DNA ribosomale di lievito (S. cerevisiae) amplificato mediante PCR. Il clonaggio molecolare oggetto dell’attività è stato l’occasione per spiegare il meccanismo dell’alfa-complementazione della beta-Galattosidasi nel ceppo di E. coli DH5alfa.

La miscela di ligasi è stata usata per trasformare cellule competenti del ceppo di E. coli DH5alfa su piastre di terreno per la selezione dei cloni ricombinati (selezione “blu/bianco”).